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ELISA試劑盒檢測動物學習記憶實驗結果介紹
更新時間:2015-05-06   點擊次數:736次

一、ELISA試劑盒檢測動物記憶獲得過程

1. 建立記憶獲得障礙模型:

在動物進行電擊訓練之前15-20分鐘,給動物腹腔注射氫溴酸東莨菪堿(膽堿能M受體拮抗劑,HBr-Scopalamine),小鼠:3mg/kg,可見給藥組動物出現探究行為,訓練時在明室內駐留時間略長于對照組,進入暗室后受到電刺激時的反應與對照組相似:嘶叫或跳躍。24小時后當再次將動物放入明室時,動物進入暗室的潛伏期顯著低于對照組,即制備成功記憶障礙模型。

2. 待測藥物的服用:

根據待檢測藥物在動物體內的作用高峰時間,于相應時間給動物服藥,如口服藥物,可于訓練前1小時給動物灌服待檢測藥物,然后再于訓練前15-20分鐘給動物損傷記憶獲得的藥物,如氫溴酸東莨菪堿等。

二、記憶鞏固過程

1. 建立記憶鞏固障礙模型:

動物電擊訓練結束后立即給動物腹腔注射蛋白質合成抑制劑環己酰亞胺(Cycloheximide,小鼠:90-100mg/kg)抑制蛋白質合成,或皮下注射NaNO2(小鼠:120mg/kg)導致動物短暫性缺氧,或給動物施行頭部瞬間電休克。然后放回飼養盒內,24小時后重測試。

2. 待測藥物的服用:

若是口服藥物,于電擊訓練前藥物作用高峰期(一般選1小時前)給動物灌服藥物。若是腹腔注射藥物,一般于訓練前半小時注射。然后給動物電擊訓練,訓練后立即給損傷記憶鞏固藥物或其它實驗因素,24小時后重測試,可ELISA試劑盒檢測認知藥物對記憶鞏固障礙的對抗作用。

三、記憶再現過程

1. 建立記憶再現障礙模型

于動物重測試之前15分鐘給小鼠灌服酒精(35%,0.1ml/10g鼠重),15分鐘后進行重測試。可見小鼠記憶提取過程受到損傷。

2. 待測藥物的服用:于動物重測試之前1小時給動物口服待檢藥物。

注意:

該損傷只有在重測*-30分鐘灌胃酒精才起作用, 時間長于30分鐘則無效。

該劑量酒精只對較不鞏固、一次性記憶有損傷作用,而對小鼠需經多次訓練而獲得的較鞏固的記憶的再現無影響。

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