elisa試劑盒白介素類(lèi)封閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結(jié)合位點(diǎn)。這就降低了可產(chǎn)生信號(hào)的抗體非特異結(jié)合的機(jī)會(huì)。您當(dāng)然也希望抗體只與目的蛋白結(jié)合吧。如果您的背景過(guò)高，懷疑封閉不充分，那么您可以嘗試使用更高濃度的封閉液，或適當(dāng)延長(zhǎng)封閉時(shí)間。
如果您一直被背景問(wèn)題所困擾，那么也許您該花些時(shí)間來(lái)優(yōu)化封閉液。這可能需要時(shí)間，但也是值得的。目前主要有兩種類(lèi)型的封閉液：蛋白和非離子型去污劑。您使用的類(lèi)型須取決于多個(gè)因素，包括微孔板的表面試劑、吸附的抗原、您的抗體和檢測(cè)試劑。好的封閉液應(yīng)降低非特異性結(jié)合，但它不應(yīng)當(dāng)與抗原、抗體或檢測(cè)試劑發(fā)生相互作用。
zui常用的非離子型去污劑是Tween-20。這種封閉液便宜、穩(wěn)定，在去除洗滌過(guò)程中的一些非特異結(jié)合上很有用。但它們只在存在時(shí)起作用，因?yàn)楹苋菀妆幌吹簟Ｒ虼怂邢礈煲褐幸脖仨毺砑臃忾]液。請(qǐng)勿使用高濃度（正常濃度為0.01-0.1%），它會(huì)降低特異結(jié)合，產(chǎn)生假陰性。另一個(gè)選擇是使用蛋白和非離子型去污劑這兩種封閉液，后者可協(xié)助洗滌過(guò)程中的封閉。
蛋白封閉液則有所不同，是*的。它們與開(kāi)放位點(diǎn)結(jié)合并封閉，同時(shí)穩(wěn)定與微孔板結(jié)合的抗原分子。常用的蛋白封閉液包括牛血清白蛋白（BSA）、脫脂奶粉、正常血清和魚(yú)明膠。血清組分的內(nèi)在多樣性可使它有效攔截許多不同類(lèi)型的分子相互作用。不過(guò)，它的缺點(diǎn)在于能與Protein A和IgG抗體相互作用。解決這個(gè)問(wèn)題的一種方法是使用雞或魚(yú)的正常血清。
抗體濃度須優(yōu)化
我們通常會(huì)follow師兄師姐留下來(lái)的操作步驟，但是如果試劑稍有不同，則可能需要優(yōu)化抗體的量。記住，非特異的抗體結(jié)合會(huì)增加背景。為了防止這一點(diǎn)，切勿使用過(guò)多的一抗或二抗。
檢測(cè)試劑要適量
另一點(diǎn)也很顯而易見(jiàn)：切勿使用過(guò)多的elisa試劑盒白介素類(lèi)。如果濃度過(guò)高，或者未正確稀釋?zhuān)瑒t會(huì)導(dǎo)致高背景。也不要顯色過(guò)度，如有必要，優(yōu)化一下何時(shí)應(yīng)加入終止液。
100060-200302 UV法含量測(cè)定 50mg 酞丁安
100061-200607 含量測(cè)定 100mg 維生素D3
10062－ 200608 含量測(cè)定 200mg 維生素E
100063-199503 含量測(cè)定 100mg 戊酸雌二醇
100065-200505 含量測(cè)定 100mg 鹽酸胺碘酮
100066-200807 含量測(cè)定 100mg 鹽酸苯海拉明
100067-200602 含量測(cè)定 100mg 鹽酸苯海索
100068-199702 含量測(cè)定 50mg 鹽酸多沙普侖
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