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皮膚黑色素瘤細胞操作規程
更新時間:2022-07-07   點擊次數:1021次

皮膚黑色素瘤細胞操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

小鼠苗條素(OB)ELISA試劑盒

小鼠苗條素(LEP)ELISA試劑盒

小鼠粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GMCSF/CSF2)ELISA試劑盒

小鼠可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒

小鼠可溶性CD80(sCD80/B7-1)ELISA試劑盒

小鼠可溶性CD80(sCD80)ELISA試劑盒

小鼠巨細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒

小鼠巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒

小鼠巨嗜細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒

小鼠巨嗜細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2)ELISA試劑盒

小鼠膠質細胞系來源的神經營養因子(GDNF)ELISA試劑盒

小鼠堿性成纖維細胞生長因子9(FGF9)ELISA試劑盒


 

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